本文是(shi)探討人參皂苷單體Rg3對外周(zhou)血(xue)來源(yuan)的樹突狀細胞(dendritic cell,DC)成熟及其功能(neng)的影響文章。研究證明人參皂苷Rg3可誘導(dao)DC成熟(shu),促進其功能轉變,在一定濃(nong)度下呈(cheng)劑量依賴性。
實驗方法：
在GM-CSF和IL-4聯(lian)合作用(yong)下,外周血單個核(he)細(xi)胞(bao)誘導(dao)分化為(wei)未成(cheng)熟DC(im DC),第(di)(di)(di)5天加入(ru)TNF-α促進成(cheng)熟,并加入(ru)不同劑量的(de)Rg3,分別(bie)設為(wei)低、中、高劑量組(zu)(zu)(Rg3濃度分別(bie)為(wei)10、20、40μg/ml)及(ji)空白對照(zhao)組(zu)(zu),誘導(dao)出Rg3-DC。流式(shi)細(xi)胞(bao)術檢(jian)測誘導(dao)第(di)(di)(di)7、14天細(xi)胞(bao)表(biao)面CD80、CD86及(ji)CD83的(de)表(biao)達;2收集培養第(di)(di)(di)7、14天時各組(zu)(zu)Rg3-DC,進行(xing)混合淋巴細(xi)胞(bao)反應,采用(yong)MTT法(fa)測定Rg3-DC刺(ci)激異體(ti)淋巴細(xi)胞(bao)增殖指數;3ELISA方(fang)法(fa)檢(jian)測各劑量組(zu)(zu)Rg3-DC分泌IL-12的(de)水平。
實驗(yan)結(jie)果
1、流式細胞(bao)術檢測Rg3-DC細胞(bao)表(biao)型
人參皂苷Rg3 中(zhong)、高(gao)劑量組培養第7、14 天后的DC表面標(biao)(biao)志CD80、CD86 及(ji)CD83 表達明顯(xian)增高(gao),與對照組比(bi)(bi)較差異有統計學(xue)意(yi)義( P < 0. 05) ,其中(zhong)DC的成(cheng)熟標(biao)(biao)志CD83,在中(zhong)、高(gao)劑量組培養14 d后分別為( 38. 6 ±2. 21) % 、( 44. 21 ± 4. 94 ) % ,明顯(xian)高(gao)于對照組的( 28. 45 ± 7. 20) % ,比(bi)(bi)較差異有統計學(xue)意(yi)義( P < 0. 05及(ji)P < 0. 01) ; 以(yi)上(shang)3 種標(biao)(biao)記(ji),低劑量組與對照組比(bi)(bi)較差異無統計學(xue)意(yi)義,見表1。
Rg3 誘導DC第7、14 天表(biao)面抗原表(biao)達(da)均數(shu)比較(±s)
2、人參皂苷Rg3對DC刺激淋巴細胞增(zeng)殖(zhi)功能的影響(混(hun)合淋巴細胞培養)
人參皂(zao)苷Rg3 0、10、20、40 μg / ml四個劑量組分(fen)別(bie)在誘(you)導DC第(di)7、14 天后刺激(ji)(ji)異體淋巴細(xi)胞(bao)增殖,研(yan)究發現(xian),高劑量Rg3 組DC在1∶ 10 比例條件下刺激(ji)(ji)淋巴細(xi)胞(bao)增殖能力高于其他(ta)劑量組,與(yu)對照組及其他(ta)劑量組比較差(cha)異有統計學意義( P < 0. 05) ,見表2。
Rg3誘導DC第7、14天(tian)刺(ci)激(ji)異(yi)體淋(lin)巴細(xi)胞增殖指數(±s)
3、人參皂苷Rg3刺激(ji)DC分泌
IL-12檢測高(gao)劑量組(zu)Rg3 ( 40 μg /ml ) 誘導的(de)DC分(fen)泌IL-12 濃度( 34. 45 ± 4. 42) pg /ml,與對照(zhao)組(zu)的(de)( 10. 24 ± 8. 82) pg /ml比較(jiao)(jiao)差(cha)異有統計學意(yi)義( P < 0. 05 ) ,低劑量組(zu)( 10μg /ml) 分(fen)泌IL-12 為( 11. 24 ± 3. 57) pg /ml,中(zhong)劑量組(zu)20 μg / ml組(zu)為( 15. 25 ± 2. 64 ) pg / ml,低、中(zhong)劑量組(zu)與對照(zhao)組(zu)比較(jiao)(jiao)差(cha)異無統計學意(yi)義( P > 0. 05) 。
結論
1
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